Výskumné záujmy
Hlavným objektom výskumu Oddelenia vývinovej fyziológie je preimplantačná vývinová perióda (t.j. obdobie medzi oplodnením vajíčka vo vajcovode a implantáciou embrya do maternice). Toto obdobie je jednou z najcitlivejších fáz v cicavčom embryonálnom vývine a poruchy, ktoré sa vyskytnú v jeho fyziologickom priebehu, sú často príčinou neúspešnej gravidity ako u ľudí tak u zvierat. Riešiteľský kolektív sa aktuálne sústredí na problematiku interakcií medzi materským organizmom a preimplantačným embryo a reparatívnymi mechanizmami prebiehajúcimi v raných embryách. Tieto procesy skúmame hlavne v kontexte fyziologického alebo zdravotného stavu matky, ako je napríklad obezita, stres alebo intoxikácia, pričom ako používame predovšetkým model laboratórnej myši:
- Pomocou modelu stresu obmedzením pohybu sme preukázali škodlivé účinky materského stresu na raný embryonálny vývin a identifikovali sme embryonálne bunkové receptory participujúce v tomto procese.
- Pomocou dvojgeneračného modelu obezity vyvolanej diétou sme zistili, že materská obezita môže nepriaznivo ovplyvniť oplodnenie a vývin embrya pred implantáciou, aj keď určitá miera telesného je pre udržanie optimálneho reprodukčného zdravia potrebná.
- Preukázali sme tiež negatívne účinky určitých typov insekticídov a potravinárskych prídavných látok na vývin raných embryí, pričom sme tiež identifikovali bunkové receptory, ktoré môžu byť zapojené do sprostredkovania týchto účinkov.
Naviac, výsledky nášho výskumu ukazujú, že stres, obezita alebo intoxikácia matky v ranom štádiu tehotenstva môžu ovplyvniť somatické a behaviorálne parametre potomstva. V rámci nášho štúdia reparatívnych mechanizmov v raných embryách sme analyzovali výskyt spontánnej apoptózy v preimplantačných embryách viacerých cicavčích druhov.
V nadväzujúcom výskume sme preukázali, že bunky preimplantačného embrya disponujú všetkými potrebnými mechanizmami na rozpoznávanie, pohlcovanie a rozloženie apoptotických buniek, čím zabezpečujú odstránenie väčšiny umierajúcich blastomér. Náš najnovší výskum sa zameriava na možnosť prevencie porúch raného embryonálneho vývinu pridaním špecifických prísad do stravy matkyOddelenie pozostáva z jedného laboratória:
- Laboratórium reprodukcie, embryológie a bunkovej signalizácie
Prístrojové vybavenie
- Konfokálny mikroskop Leica TCS SP5 s “live-cell imaging” systémom na štúdium funkčnej morfológie živých buniek v reálnom čase
- Automatizovaný priamy fluorescenčný mikroskop Nikon Eclipse 90i na štúdium funkčnej morfológie buniek a morfologickú diagnostiku mikroflóry
- Priamy fluorescenčný mikroskop Olympus BX51 na štúdiun funkčnej morfológie buniek a morfologickú diagnostiku mikroflóry (spolu s NbU)
- Inverzný fluorescenčný mikroskop Nikon Ti-E s mikromanipulačnou zostavou (Eppendorf) na mikromanipulačné zásahy na bunkovej úrovni
- Inverzný svetelný mikroskop Nikon Ti-U na štúdiun morfológie buniek kultivovaných in vitro
- Ramanovský spektrometer DXR s mikroskopom (Thermo Fisher Scientific) na metabolomnickú analýzu buniek a biologických tekutín
- Analyzátor celotelovej magnetickej rezonancie pre laboratórne zvieratá EchoMRI 700 na meranie telesného tuku laboratórnych zvierat
- Neinvazívny tlakomer pre laboratórne zvieratá CODA na meranie krvného tlaku laboratórnych zvierat
- Real-time PCR systémy LC480 (Roche) a CFDX Opus (BioRad) pre detekciu a kvantifikáciu vybraných sekvencií nukleových kyselín (génov)
- Mikroplatničkový multidetekčný analyzátor Synergy 2 (Biotek) pre analýzy vyžadujúce meranie fluorescencie, luminiscencie a absorbancie
- Kapilárový mikroelektroforetický systém Agilent 2100 pre automatickú elektroforetickú analýzu DNA, RNA a proteínov.
- Multiporátor Eppendorf pre elektroporáciu eukaryotických buniek, baktérií a kvasiniek
- Zobrazovací systém s vysokou senzitivitou detekcie Fusion FX7 (Vilber Lourmat) pre detekciu chemiluminiscenčného signálu na membránach (Western blot analýza)
- Mikrospektrofotometer NanoDrop (Thermo Scientific) pre spektrometrické meranie limitovaných objemov (1 ul) nukleových kyselín
